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1.结締组织染色 1.2.网状纤维染色法
发布人:xiaridebing    点击率:2463次
1.2.网状纤维染色法
1.2.1.Wildr氏银浸润法
[   ]
10%甲醛及任何固定液均可。
[   ]
0.25%过锰酸钾水溶液
5%草酸水溶液
1%硝酸铀水溶液
双氨氢氧化银液:    
10%硝酸银水溶液     5ml
3.1%氢氧化钠        5ml
浓氨水
蒸馏水
配制:硝酸银与氢氧化钠液混合,产生棕色沉淀,以浓氨水逐滴加入并不停摇荡溶解,直至沉淀恰好溶解完为无色,加蒸馏水至50ml
显影液:          
1%硝酸铀水溶液     1.5ml
甲醛                0.5ml
蒸馏水              50ml
0.25%氯化金水溶液
5%次亚硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.0.25%过锰酸钾氧化1分钟,蒸馏水洗。
3.5%草酸还1分钟,蒸馏水洗。
4.1%硝酸铀媒染10秒,蒸馏水快洗。
5.双氨氢氧化银液浸润1分钟。
6.迅速通过95%酒精。
7.显影液内1分钟,蒸馏水洗。
8.02%氯化金水溶液增色1分钟,蒸馏水洗。
9.5%次亚硫酸钠定影1—2分钟,水洗;
10.对比染色(HE或VG染色)
11.常规脱水,透明,封固。
[    ]
网状纤维呈黑色


1.2.2.Foot氏银浸润法
[   ]
Zenker氏液最佳,甲醛液亦可适用。
[   ]
0.5%碘—酒精(95%)溶液
0.5%硫代硫酸水溶液
0.25%过锰酸钾水溶液
1%草酸水溶液
2%硝酸银水溶液;
氨银液:    
10%硝酸银水溶液   10ml
40%氢氧化钠       10dp
26-28%氨水        1-2ml
蒸馏水
配制:10%硝酸银10ml加40%氢氧化钠10滴(立即产生沉淀),以26-28%氨水慢慢逐滴加入,不断摇动(约1ml),使沉淀好溶解, 补足蒸馏水至40ml, 用时过滤
20%中性甲醛水溶液
1%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.0.5%碘酒****5分钟,水洗。
3.0.5%硫代硫酸钠液5分钟。
4.自来水洗,蒸馏水洗。
5.0.25%过锰酸钾液氧化1分钟,蒸馏水洗。
6.1%草酸液还原1分钟,蒸馏水换洗数次。
7.2%硝酸银液于暗处室温12—24小时,蒸馏水速洗。
8.置氨银液内30分钟,蒸馏水急洗二次。
9.2%中性甲醛还原10—15分钟(并换1—2次新液),水洗。
10.1%氯化金液调色10—20分钟,蒸馏水洗数次。
11.5%硫代硫酸钠液除去多余银盐2分钟,水洗。
12.对比染色。
13.常规脱水,透明,封固。
[    ]
网状纤维呈黑色或紫黑色。

 
1.2.3.Foot-Menard氏银浸润法
[    ]
Zenker氏液,10%甲醛液。
[    ]
0.25%过锰酸钾水溶液
5%草酸水溶液
氨银液:   
10%硝酸银水溶液              10ml
饱和碳酸锂水溶液(约13%)   10ml
浓氨水(约)                   0.8ml
蒸馏水.
配制:10%硝酸银液10ml加饱和碳酸锂10ml混合后产生沉淀倾去上清,将沉淀以蒸馏水洗涤三次,再加蒸馏水25ml,滴加浓氨水约0.8ml边加边摇至沉淀恰好溶解,最后加蒸馏水至100ml。
20%甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
5%次亚硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
(Zenker氏液固定的组织以脱汞处理)
2.0.25%过锰酸钾溶液5分钟,蒸馏水洗。
3.5%草酸液5分钟,蒸馏是洗。
4.置氨银溶液于37℃温箱内10—15分钟,蒸馏水洗。
5.20%甲醛液显影5分钟,水洗。
6.0.2%氯化金液5分钟,水洗。
7.5%次亚硫酸钠2分钟,水洗。
8.对比染色。
9.常规脱水,透明,封固。
[    ]
网状纤维呈黑色。

 
1.2.4.Gomori氏银浸润法
[   ]
10%甲醛液等。
[   ]
1%过锰酸钾水溶液
1%草酸水溶液(或1-3%亚硫酸钾水液)
2%铁明矾水溶液.
氨性浸润液:       
10%硝酸银水溶液     20ml
10%氢氧化钾水溶液   5ml
浓氨水
蒸馏水
配制:10%硝酸银20ml加班10%氢氧化钾5ml混合产生沉淀后倾去上清,以蒸馏水反复洗沉淀物数次,加蒸馏水至25ml,逐滴加浓氨水至沉淀溶解,再加10%硝酸银数滴至溶液稍见混浊,加少量浓氨水使之重行变清,用等量的蒸馏水稀释之。
10%甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
3%亚硫酸钾水溶液
3%次亚硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.1%过锰酸钾水溶液氧化1—2分钟,蒸馏水洗。
3.1%草酸水溶液还原1分钟,蒸馏水洗。
4.2%铁明矾水溶液1分钟,蒸馏水洗。
5.氨性银液3分钟,蒸馏水洗。
6.0.2%氯化金水溶液5分钟;蒸馏水洗。
7.3%亚硫酸钾水溶液1分钟,水洗。
8.3%次亚硫酸钠水溶液1分钟水洗。
9.常规脱水,透明,封固。
[   ]       
 网状纤维呈黑色。

 
1.2.5.GordonSweet氏银浸润法
[   ]
10%甲醛液等。
 [   ]
酸性过锰酸钾水溶液
0.5%过锰酸钾水溶液    50ml
3%硫酸水溶液          3ml
(临用时混和)
1%草酸水溶液
2%铁明矾水溶液
双氨氢氧化银液:   
10%硝酸银水溶液       5ml
3%氢氧化钠水溶液      5ml
浓氨水
蒸馏水
配制:10%硝酸银液5ml,逐滴加氨水,不停摇动硝酸银遇氨水后即产生沉淀,当其沉淀复被氨水溶解后,再加3%氢氧化钠液5ml溶液中新产生沉淀,再滴加氨水至沉淀溶解,加蒸馏水至总量50ml过滤于棕色瓶内。
10%中性甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.酸性过锰酸钾水溶液氧化5分钟,蒸馏水洗。
3.1%草酸水溶液将切片漂白,蒸馏水洗。
4.2%铁明矾水溶液媒染15分钟,蒸馏水洗。
5.双氨氢氧化银液中5—60秒(视银液新旧而定),蒸馏水速洗二次。
6.0.2%氯化金水溶液1—2分钟,蒸馏水洗数次。
7.5%硫代硫酸钠水溶液1—5分钟,水洗。
8.常规脱水,透明,封固。
[   ]
 网状纤维呈黑色。
 

 
1.2.6.Beilschowsky氏银浸润法
[   ]
10%甲醛液等。
[   ]
0.25%过锰酸钾水溶液
2.5%草酸水溶液
2%硝酸银水溶液
氨性银液:      
硝酸银                 0.6g
蒸馏水                 10ml
40%氢氧化钠水溶液     2drp
浓氨水
配制:硝酸银以10ml蒸馏水溶解,滴加40%氢氧化钠液2滴,产生沉淀后用浓氨水慢慢滴入至沉淀将近完全溶解,再加蒸馏水20ml过滤使用。临用时新配。
20%甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.0.25%过锰酸钾水溶液氧化10分钟,蒸馏水洗;
3.2.5%草酸水溶液漂白,蒸馏水洗数次。
4.置2%硝酸银水溶液中于暗处12—24小时,蒸馏水速洗二次。
5.氨性银液内30—40分钟(切片略见浅褐色)。
6.蒸馏水速洗二次。
7.20%甲醛水溶液10分钟,蒸馏水充分洗。
8.0.2%氯化金水溶液调色2—5分钟,蒸馏水洗数次。
9.5%硫代硫酸钠水溶液固定1—2分钟,充分水洗。
10.常规脱水,透明,封固。
[    ]
网状纤维呈黑色。

 
1.2.7.Perdrau氏银浸润法
[   ]
10%甲醛液固定24小时以上,流水冲洗12—24小时,换蒸馏水换洗24小时。制成石蜡或冰冻切片。
[   ]
0.25%过锰酸钾水溶液
Pal氏脱色液:     
1%草酸水溶液        50ml
1%亚硫酸钾水溶液    50ml
2%硝酸银水溶液
氨性银液:       
20%硝酸银水溶液      5ml
40%氢氧化钠水溶液    2drp
浓氨水
蒸馏水
配制:20%硝酸银5ml加40%氢氧化钠液2滴即产生沉淀,以浓氨水徐徐滴入至沉淀将近溶解,蒸馏水加至50ml。临用时新配。
20%甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.蜡片用蒸馏水充分洗涤。
2.0.25%过锰酸钾水溶液10分钟,蒸馏水洗。
3.Pal氏脱色液脱色,蒸馏水换洗数小时。
4.2%硝酸银液置暗处12—24小时,蒸馏水速洗。
5.氨性银液40—60分钟(略显褐色)蒸馏水速洗。
6.20%甲醛水溶液30分钟(立即变黄色),蒸馏水洗。
7.0.2%氯化金水溶液1—2分钟,蒸馏水洗。
8.5%硫代硫酸钠水溶液1—2分钟。
9.充分水洗,展平贴于玻片上。
10.常规脱水,透明,封固。
[   ]
网状纤维呈黑色;脱蜡胶原纤维呈黄色。

 
1.2.8.简便网状纤维染色法
[    ]
 10%甲醛固定液。
[    ]
0.25%高锰酸钾水溶液
0.5%草酸水溶液
5%硫酸铁胺水溶液
氨银液:
10%硝酸银溶液         15dip
氨水                   2dip
配制:取5ml小烧杯,先滴2滴浓氨水,再滴硝酸银14~15滴左右,稍混浊后,加等量蒸馏水,过滤后使用。
10%甲醛溶液
0.2%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.0.25%高锰酸钾水溶液3~5分钟。
3.蒸馏水洗。
4.0.5%草酸水溶液漂白1~2分钟。
5.蒸馏水洗。
6.5%硫代硫酸钠水溶液媒染5~15分钟。
7.蒸馏水洗三次。
8.滴加氨银液置切片上于湿盒内染20~30分钟。
9.蒸馏水速洗。
10.10%甲醛溶液还原1~2分钟。
11.自来水洗,蒸馏水洗。
12.0.2%氯化金水溶液调色1~2分钟。
13.蒸馏水洗。
14.5%硫代硫酸钠水溶液固定3~5分钟。
15.蒸馏水洗。
16.脱水,透明,封固。
[    ]
网状纤维呈黑色;胶原纤维呈灰色。
 

 
1.2.9.Del Rio-Hortega氏法
[    ]
10%甲醛固定液或其他固定液。
[    ]
碳酸氨银液:
10%硝酸银水溶液             5ml
5%碳酸钠水溶液             15ml
氨水
蒸馏水                      55ml
硝酸银液于碳酸钠水溶液混合,逐滴加入氨水,随滴随加震荡,直至沉淀被其溶解。再加蒸馏水,过滤后即可应用。此溶液可长期贮存于棕色瓶内。
1%甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.碳酸氨银液内45~50℃1~2分钟。
3.1%甲醛水溶液还原至切片呈黄色。
4.蒸馏水洗。
5.0.2%氯化金水溶液调色30秒钟。
6.蒸馏水洗。
7.5%硫代硫酸钠水溶液固定1分钟。
8.自来水洗,常规脱水、透明,封固。
[    ]
网状纤维呈黑色。
[    ]
网状纤维染色主要用于癌与肉瘤,网织细胞肉瘤和其他淋巴肉瘤的鉴别诊断;区别血管内皮瘤和血管外皮瘤以及协助鼻咽癌的诊断。
[注意事项]
银浸润法主要是靠化学反应,因此所用的一切玻璃器皿要求化学纯净。试剂要求分析纯,用量要准确。蒸馏水洗涤要彻底,定影前不得接触自来水及金属用具。